Determining reference ranges for immunological cells of healthy indigenous individuals from a region in Brazil

ABSTRACT Objective The establishment of reference values for a subset of leukocytes is common in clinical practice, and ethnic variations are strongly associated with disease development. In Brazil, indigenous people are vulnerable to infections, and few studies have described the health and disease conditions of this population. This study aimed to provide reference values for immunological cell subsets in indigenous Brazilians living in the state of Mato Grosso do Sul. Methods Flow cytometry and 4-color combinations of monoclonal antibodies were used to characterize cells. A total of 115 healthy adults, mostly females (72%), were included in the study. The results are presented as mean and median (2.5%-97.5% percentiles) for T and B lymphocytes, CD4+ T cells, CD8+ T cells, Natural Killer cells, monocytes, and dendritic cells, providing an average immunological profile for the population in question. Results The relative medians of CD3+, CD4+, and CD8+ T cells were significantly higher in women than in men in a healthy indigenous population. Conclusion To our knowledge, cell reference data from indigenous Brazilians are unknown in the literature. The immune cell results presented in this pioneering study will contribute to the clinical and laboratory evaluation of the Brazilian indigenous population, especially given the important differences when compared with other Brazilian ethnic groups.

Seroepidemiology of hepatitis B in individuals born between 1945-1985 on a Brazilian regional metropolis / Soroepidemiologia da hepatite B em indivíduos nascidos entre 1945-1985 em uma metrópole regional Brasileira

Background: hepatitis B prevalence can be influenced by social/cultural behavior and the Baby Boomer (BB) generation(1945-1964) may have been more susceptible to this infection. Objectives: We investigated the seroprevalence of markers for HBV infection and vaccination and its association with main risk factors. Methodology: a random sample of individuals aged 30-70 years old in a public clinical laboratory from a metropolitan area of Bahia/Brazil were tested for HBsAg/Total Anti-HBc/Anti-HBs/Anti-HBc-IgM and a socio-demographic questionnaire was applied. Results: of the650 participants, 349 were 51-70 yo (BB) and 301 were non-BB. The prevalences were HBsAg (2.3%), Total Anti-HBc (17.1%) and Anti-HBs (27.4%). Anti-HBcIgM (2.7%) was performed in 112 participants sera who had contact/infection with HBV. The laboratory profiles were characterized as susceptibility (68%), vaccine response (14.8%) and contact/infection with HBV (17.2%). BB participants were more susceptible and less vaccinated than non-BB. The higher frequency of contact/infection status was observed in the BB generation. Statistically significant differences were found for the contact/infection status in males(50,9%) illicit drug use (11,6%), syringe/needle sharing (7,1%), and blood transfusion (10,7%). Non-BB with contact/ infection profile reported more tattoo/piercing and BB reported higher use of glass syringes. Conclusion: the majority of the study population was susceptible to infection but participants older than 50 years showed both, a higher frequency of this profile and also a higher frequency of contact/infection status, thus suggesting the need for greater health care attention for this age group.

Introdução: a prevalência de hepatite B pode ser influenciada pelo comportamento sociocultural e a geração Baby Boomer (BB) (1945-1964) pode ter sido mais suscetível a esta infecção. Objetivos: Investigar a soroprevalência de marcadores para a infecção pelo VHB e resposta vacinal e associação com fatores de risco. Metodologia: soro de indivíduos de 30 a 70 anos randomicamente selecionados em um laboratório publico de análises clínicas na área metropolitana do Brasil foram testados para AgHBs/ Anti-HBc Total /Anti-HBs/Anti-HBc-IgM. Todos responderam questionário sociodemográfico contendo perguntas sobre fatores de risco para hepatite B. Resultados: dos 650 participantes, 349 eram BB (51-70 anos) e 301 eram não-BB (30-50 anos). As prevalências estimadas foram: HBsAg (2,3%), Anti-HBs (27,4%). Entre os Anti-HBc Total (17,1%) apenas 2,7% foram Anti-HBc IgM. Os perfis laboratoriais foram caracterizados como suscetibilidade (68%), resposta vacinal (14,8%) e contato com VHB (17,2%). Na distribuição por idade, os BB foram mais susceptíveis, menos vacinados e apresentaram maior frequência de contato/infecção que os não-BB. Diferenças estatisticamente significantes foram encontradas no status contato/infecção e as seguintes variáveis: sexo masculino, uso de drogas ilícitas, compartilhamento de seringas de vidro/agulhas e transfusão de sangue. Não-BB com status contato/infecção relataram ter mais tatuagem/piercing e BB relataram maior uso de seringas de vidro. Conclusão: a maioria da população estudada era suscetível ao VHB, mas os participantes com mais de 50 anos apresentaram tanto uma maior frequência desse status quanto do status contato/ infecção, sugerindo a necessidade de maior atenção à saúde para indivíduos desta faixa etária.

Frequency and factors associated with Toxoplasma gondii infection in pregnant women and their pets in Ilhéus, Bahia, Brazil

Abstract INTRODUCTION: Toxoplasmosis is an asymptomatic disease that can lead to systemic disease in the fetus of pregnant women with primary infection. This study aimed to determine the prevalence of toxoplasmosis, associated factors, and correlation between the serology of pregnant women and their pets, in the municipality of Ilhéus, Bahia, Brazil. METHODS: This cross-sectional study was conducted in 196 pregnant women and their cats or dogs (n=89). Semi-structured interviews were conducted and serum samples from the pregnant women were tested to detect IgM and IgG antibodies against Toxoplasma gondii, and avidity tests were performed for IgM-positive samples. The serum collected from pets were tested for IgG antibodies, and IgM antibodies in cats. A non-conditional logistic regression analysis was performed to identify infection-associated factors. RESULTS: IgG and IgM antibodies were detected in 67.9% (133/196) and 1.5% (3/196) samples, respectively, for women with an avidity of over 60%. Age ≥ 25 and the presence of cats in the vicinity were found to be associated with infection, while the level of education and previous orientation toward prevention of toxoplasmosis were protective factors in pregnant women. IgG antibodies were detected in 46.1% (41/89) of the animals, and cats were found to be negative for IgM. For the animals, age ≥ 1 year was a factor associated with infection. There was no correlation between serology of the pregnant women and the animals (p=0.15). CONCLUSIONS: An elevated prevalence of toxoplasmosis was detected in the region. Therefore, the adoption of preventive measures by public healthcare bodies is recommended.

O receptor de quimiocina CXCR3/CD183 na tuberculose / The chemokine receptor CXCR3/CD183 in tuberculosis

Introdução: o receptor CXCR3/CD183 juntamente com seu indutor IFNy e seus ligantes CXCL9, CXCL10 e CXCL11 têm sido descritos como de grande importância na resposta imune do perfil T helper 1 (Th1). Este grupo de quimiocinas é expresso no microambiente e permite a migração de células ao sítio da infecção para combater o patógeno. Objetivo: revisar o atual estado da arte sobre o papel do receptor CXCR3/CD183 na tuberculose. Metodologia: o presente estudo inclui a revisão narrativa de 12 artigos que foram selecionados a partir de 74 artigos encontrados nas bases de dados PubMed e Sciencedirect entre primeiro de agosto e 31 de outubro de 2014. Resultados: diferentes abordagens vêm sendo utilizadas para o estudo desse receptor. A utilização de modelos animais como camundongos, coelhos e macacos é a mais comum. Porém, ensaios in vitro com células humanas do sangue periférico e efusão pleural também já foram utilizados para representar, com maior fidelidade, a resposta ao Mycobacterium tuberculosis (Mtb) pelo sistema imune humano. Esses estudos resultaram em importantes achados sobre o papel do receptor CXCR3 na tuberculose (TB), principalmente quanto à expressão em linfócitos e neutrófilos, assim como o padrão de coexpressão de outros receptores. Conclusão: o CXCR3 é o receptor de uma importante citocina (IP-10) induzida pelo IFN-gama, produzida na resposta Th1, eficaz na resposta à tuberculose. Nesse trabalho, resssalta-se que foram encontrados poucos estudos sobre o tema e isso demonstra a necessidade de realização de novas pesquisas, a fim de melhor investigar o papel desse importante receptor na tuberculose.

Introduction: the CXCR3/CD183 receptor along with its IFNy inducer and its ligands: the chemokines named CXCL9, CXCL10 and CXCL11 are of great importance in the Th1 (T helper 1) immune response. This group of chemokine modulates the migration of cells to the site of infection to defend against the pathogen. Objective: to investigate the current state of the art on the role of the receptor CXCR3/CD183 in tuberculosis. Methodology: the present study includes the narrative review of 12 articles that were selected from 74 articles found in the PubMed and Sciencedirect databases between August 1 and October 31, 2014. Results: different approaches have been used for the study of this receptor. The use of animal models such as mice, rabbits and monkeys is more common. However, in vitro assays with human peripheral blood cells and pleural effusion were also used to represent more faithfully the response to Mycobacterium tuberculosis (Mtb) by the human immune system. These studies resulted in significant findings on the role of the CXCR3 receptor in tuberculosis (TB), especially for expression in lymphocytes and neutrophils, as well as the pattern of co-expression of other receptors. Conclusion: CXCR3 is the receptor for an important cytokine (IP-10) induced by IFN-gamma, produced in the Th1 response, effective in responding to tuberculosis. In this work, it is emphasized that cheeses found few studies on the subject and demonstration, the need for conducting research, in order to better investigate the role of this important receptor in tuberculosis.

Interferon-gamma release assay performance in northeastern Brazil: influence of the IFNG+874 A>T polymorphism

ABSTRACT Introduction Latent tuberculosis infection diagnosis based on the release of interferon-gamma in cultures of peripheral blood cells stimulated with Mycobacterium tuberculosis antigens has replaced the tuberculin skin test in many countries with low tuberculosis prevalence. The IFN-γ production can be influenced by genetic polymorphisms, of which the IFNG + 874 (rs62559044) locus is the most studied. We investigated the possible influence of the IFNG + 874 A/T polymorphism on interferon-gamma test performance. Methods Patients diagnosed with pulmonary tuberculosis (75), volunteers with positive tuberculin skin test (70) and healthy volunteers with negative tuberculin skin test and no history of contact with tuberculosis (57) were evaluated regarding the IFNG + 874 genotype and the IFN-γ levels in whole blood cultures performed using an interferon-gamma commercial kit (QuantiFERON-TB® Gold In-Tube). Results IFN-γ production was not influenced by the IFNG + 874 genotype, regardless of antigen or mitogen-based stimulation, which suggests that other genes may influence IFN-γ production in response to mycobacteria. The IFNG + 874 polymorphism was found to exert no influence over QFT-IT test sensitivity in our study. Conclusions The IFNG + 874 polymorphism was not shown to influence QuantiFERON-TB® Gold In-Tube test performance in an admixed population from northeastern Brazil.

Rapid molecular test for tuberculosis: impact of its routine use at a referral hospital / Teste rápido molecular para tuberculose: avaliação do impacto de seu uso na rotina em um hospital de referência

ABSTRACT Objective: To evaluate the impact of the use of the molecular test for Mycobacterium tuberculosis and its resistance to rifampin (Xpert MTB/RIF), under routine conditions, at a referral hospital in the Brazilian state of Bahia. Methods: This was a descriptive study using the database of the Mycobacteriology Laboratory of the Octávio Mangabeira Specialized Hospital, in the city of Salvador, and georeferencing software. We evaluated 3,877 sputum samples collected from symptomatic respiratory patients, under routine conditions, between June of 2014 and March of 2015. All of the samples were submitted to sputum smear microscopy and the Xpert MTB/RIF test. Patients were stratified by gender, age, and geolocation. Results: Among the 3,877 sputum samples evaluated, the Xpert MTB/RIF test detected M. tuberculosis in 678 (17.5%), of which 60 (8.8%) showed resistance to rifampin. The Xpert MTB/RIF test detected M. tuberculosis in 254 patients who tested negative for sputum smear microscopy, thus increasing the diagnostic power by 59.9%. Conclusions: The use of the Xpert MTB/RIF test, under routine conditions, significantly increased the detection of cases of tuberculosis among sputum smear-negative patients.

RESUMO Objetivo: Avaliar o impacto do teste rápido molecular automatizado Xpert MTB/RIF, utilizado para a detecção de Mycobacterium tuberculosis e sua resistência à rifampicina, em condições de rotina, em um hospital de referência no estado da Bahia. Métodos: Estudo descritivo retrospectivo utilizando o banco de dados do Laboratório de Micobacteriologia do Hospital Especializado Octávio Mangabeira, localizado na cidade de Salvador, e um programa de georreferenciamento. Entre junho de 2014 e março de 2015, foram incluídas no estudo 3.877 amostras de escarro coletadas de pacientes sintomáticos respiratórios em condições de rotina. Todas as amostras coletadas foram submetidas tanto à baciloscopia quanto a Xpert MTB/RIF. Os pacientes foram estratificados por sexo, idade e georreferenciamento. Resultados: Das 3.877 amostras de escarro analisadas, Xpert MTB/RIF detectou a presença de M. tuberculosis em 678 pacientes (17,5%). Desses, 60 (8,8%) apresentaram resistência à rifampicina. O Xpert MTB/RIF detectou 254 pacientes com baciloscopia negativa, representando um acréscimo diagnóstico de 59,9%. Conclusões: A implantação do Xpert MTB/RIF, sob condições de rotina, teve um impacto significativo no aumento da detecção de casos de tuberculose em pacientes com baciloscopia negativa.

Hepatite B na Bahia, Brasil segundo sistema de informação de agravos de notificação, 2013 / Hepatitis B in Bahia, Brazil according to the notifiable diseases surveillance system database, 2013

Objetivo: estudar os aspectos sócio-demográficos e epidemiológicos da hepatite B no estado da Bahia e avaliar a metodologia da notificação. Metodologia: em estudo descritivo foram avaliados os registros dados de pacientes do estado da Bahia notificados com hepatite B no Sistema de Informação de Agravos de Notificação. A amostra foi de 371 notificações, de janeiro a agosto de 2013. Das 52 variáveis que constituem a Ficha de Investigação (SINAN) foram selecionadas 10 variáveis de importância epidemiológica para hepatite B (HB), por relevância neste estudo, para cálculo das frequências absolutas e relativas. Resultados: em relação aos aspectos sócio-demográficos 53,4% foram do sexo masculino e a média de idade foi de 38 anos, mínima de 4 e máxima de 78 anos. As maiores fontes de transmissão foram a sexual 62,2% pessoa/pessoa 6,4% e transfusão de hemoderivados 4,8%. A variável "ignorados" correspondeu a 47,3% das notificações. Sobre a escolaridade dos infectados 22,9% eram do Ensino Médio Completo e 22,5% Fundamental Incompleto. Salvador foi o município que mais notificou casos do vírus da hepatite B (HBV) com 91, seguido por Jequié 35 e Camaçari 24. Não fizeram uso da vacina contra HBV 76,0%. Na classificação etiológica 97,3% foi de monoinfecção pelo HBV e 2,7% co-infecção com HCV. Na classificação clínica 86,9% apresentaram HB crônica e 10,4% HB aguda. Conclusão: encontrou-se pouca associação entre escolaridade e HB na população. A variável de maior fonte de transmissão registrada foi à sexual. O sexo masculino apresentou maior frequência para o HBV. Observou-se que na maioria dos notificados havia itens importantes não preenchidos.

Objective: to study the sociodemographic and epidemiological aspects of hepatitis b in the state of bahia, brazil and to evaluate the methodology involved in the notification procedure. Methodology: this descriptive study evaluated data referring to 371 patients from the state of Bahia registered as cases of hepatitis B in the national notifiable diseases surveillance system (SINAN) database between January and August 2013. Of the 52 variables included in the SINAN investigation form, 10 variables of epidemiological importance were selected and described as absolute and relative frequencies. Results: regarding the sociodemographic aspects, 53.4% of cases were male and the mean age was 38 years (range 4-78 years). Transmission was mainly sexual (62.2%),person-to ­ person (6.4%) or by transfusion of blood products (4.8%). In 47.3%, the mode of transmission was unknown. Regarding education, 22.9% of cases had completed high school, while 22.5% had failed to complete elementary school. With 91 cases, Salvador was the city with most notifications, followed by Jequié (35) and Camaçari (24).Overall, 76.0% had not been vaccinated against the hepatitis B virus (HBV). In the etiological classification, 97.3% of cases consisted of HBV mono-infection, while 2.7% were co-infected with the hepatitis C virus. Clinically, the disease was chronic in 86.9% of cases and acute in 10.4%. Conclusion: education level and hepatitis B were found to be associated in this population. The most common mode of transmission was sexual, with most cases occurring in males. In the majority of cases, important items on the notification form had not been completed.

Uma abordagem sItuacional do gerenciamento de resíduos de serviços de saúde animal / Enfoque de la situación de la gestión de los residuos de servicios de salud animal / Findings about animal health waste management

O objetivo deste trabalho foi realizar uma análise situacional sobre o gerenciamento de resíduos de serviços de saúde em unidades veterinárias na cidade de Salvador, Bahia. O estudo foi realizado no período de abril de 2007 a setembro de 2008. Um questionário foi elaborado e aplicado em 38 unidades veterinárias distribuídas pelo município de Salvador, Bahia. Os dados foram avaliados e quantificados proporcionalmente. A maioria dos estabelecimentos entrevistados (79%) não possuía plano de gerenciamento de resíduos de serviços de saúde. Entre os poucos que o possuíam, apenas 25% cumpriam as regras plenamente. Quando questionados sobre a legislação, mais da metade dos entrevistados informava não conhecer nenhuma legislação referente ao assunto e afirmava que a falta de informação é o principal motivo para o não cumprimento do gerenciamento de resíduos de serviços de saúde. A maioria dos entrevistados informava ter interesse em cursos de capacitação para os funcionários. Adicionalmente, os dados obtidos mostraram que 63% dos estabelecimentos utilizavam empresa pública para a coleta externa dos resíduos. Acredita-se que a realização de mais estudos, aliada a um incremento nas atividades educativas e na fiscalização dos estabelecimentos são necessários para promover a resolução do problema.

The scope of this study was to realize a situational analysis about the health solid waste management in veterinary establishments in the city of Salvador, Bahia, Brazil. The study was realized in the period of April 2007 to September 2008. A questionnaire was elaborated and applied in 38 veterinary unities distributed in the municipal of Salvador, Bahia, Brazil. The data was evaluated and quantified proportionally. The majority of the interviewed establishments (79%) did not have a plan for the management of health solid waste. Among the few that had it, only 25% follow the rules. When questioned about the legislation, more than a half informed that they were not aware of any legislation regarding the issue and declared that the lack of information was the main reason for the non-compliance to the management of health solid waste. The majority of those interviewed had interest in training courses for their staff. Additionally, it was verified that 63% of the establishments used public institutions for the collection of waste. It is believed that the realization of more studies, together with an increment in the educative activities and inspection of the establishments are necessary to promote the resolution of the problem.

El objetivo de este estudio fue realizar un análisis de la situación en la Gestión de Residuos de Servicios de Salud en las unidades veterinarias de la ciudad de Salvador, Bahia. El estudio se realizó en el periodo comprendido entre abril de 2007 y septiembre de 2008. Fue elaborado y aplicado un cuestionario a 38 unidades veterinarias distribuidas por la ciudad de Salvador, Bahia. Los datos fueron evaluados y cuantificados proporcionalmente. La mayoría de los establecimientos encuestados (79%) no tenían Plan de Gestión de Residuos de Servicios de Salud, y entre los pocos que lo tenían sólo el 25% cumplen plenamente con las normas. En cuanto a la legislación, más de la mitad de los encuestados informaron no saber nada de la legislación con respecto al tema y que la falta de información es la principal razón para el incumplimiento de la Gestión de Residuos de Servicios de Salud. La mayoría de los encuestados reportaron un interés en cursos de capacitación para los empleados. Además, los datos obtenidos mostraron que el 63% de los establecimientos utilizaban empresa pública para recoger los residuos. Se cree que otros estudios, combinado con un aumento en las actividades educativas y la supervisión de las instituciones son necesarios para promover la resolución del problema.

Soroepidemiologia da doença de Newcastle em plantéis de avestruzes dos Estados da Bahia e de São Paulo / Serologic occurrence of Newcastle disease in ostriches raised in Bahia and São Paulo

Estudos sorológicos em Avestruzes (Struthio camelus) são ferramentas úteis para analisar os riscos relacionados à Doença de Newcastle nesses plantéis e à avicultura nacional. No presente estudo, amostras de sangue foram obtidas de avestruzes de ambos os sexos, de diferentes faixas etárias e sem apresentação de sintomatologia clínica, criadas nos Estados da Bahia e de São Paulo com o objetivo de avaliar a presença de anticorpos contra o vírus da Doença de Newcastle por meio de ELISA indireto. Foram testadas 339 amostras provenientes do Estado da Bahia e 105 amostras do Estado de São Paulo. Apesar de os proprietários afirmarem que não foi utilizada vacina em seus animais, foi verificada positividade na Bahia de 17,9 por cento e de 4,7 por cento em São Paulo, em avestruzes, sugerindo contato com vírus vacinal ou de campo.

Serological studies in ostriches (Struthio camelus) are important tools to assess the risk of Newcastle disease in these herds and to the national poultry industry. In the present study blood samples were obtained from male and female ostriches without symptoms of the disease, raised in Bahia and São Paulo in order to evaluate the presence of antibodies against Newcastle disease virus using an indirect ELISA. There were collected 339 samples in Bahia and 105 samples in São Paulo. Although the owners guarantee that animals were not vaccinated, it was verified the presence 17,9 percent positives in Bahia and 4,7 percent in São Paulo, suggesting contact with vaccinal or field strain.

Antibody response to a chromatographic fraction of Porphyromonas gingivalis and its correlation with periodontal status

Porphyromonas gingivalis tem sido fortemente associado à gravidade das doenças periodontais e estimula respostas celulares e humorais no hospedeiro. Objetivo: Correlacionar os níveis de IgA, IgG e subclasses de IgG contra uma fração cromatogrßfica do extrato de Porphyromonas gingivalis ATCC33277 extract e descritores clínicos periodontais. Material e Métodos: Indivíduos com periodontite (29) e com saúde periodontal (26) foram avaliados de acordo com as medidas de profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica. O extrato de Porphyromonas gingivalis foi fracionado por cromatografia de troca iônica e a resposta humoral contra a fração IV foi avaliada por ôenzyme linked immunosorbent assayõ. Resultados e Conclusão: O percentual de sítios com sangramento à sondagem (critério 1) estava correlacionado significativamente com os níveis séricos de IgG2 (r = 0,385; p < 0,05). Os níveis de IgG total e IgG2 correlacionaram-se significativamente com o percentual de sítios com nível de inserção clínica (NIC) ≥ 3 mm (critério 2) (r = 0,428; p < 0,05 e r = 0,510; p < 0,01, respectivamente), NIC ≥ 5 mm (critérion 3) (r = 0,499 e r = 0,518, respectivamente; p < 0,01) e percentual de sítios com NIC ≥ 3 mm associado a profundidade de sondagem ≥ 4 mm e sangramento à sondagem no mesmo sítio (criterion 4) (r = 0,607; p < 0,001 e r = 0,487; p < 0,01, respectivamente). Foi observada uma correlação positiva estatisticamente significante entre os níveis de IgGA e IgG1 e o critério 4 (r = 0,339 e r = 0,345, respectivamente; p < 0,05), e entre os níveis de IgG3 e o critério 3 (p < 0,05; r = 0,370). Estes resultados indicam que quanto mais acurado for o critério de diagnóstico empregado para a determinação da doença periodontal, maiores os níveis séricos de imunoglobulinas.

Prevalência de porphyromonas gingivalis. e leucometria, em mestiços brasileiros com periodontite crónica severa / Porphyromonas gingivalis prevalence and leukometry in Brazilians of mixed race with severe chronic periodontitis

Objetívos: Sendo a periodontite uma doença multifatorial que se inicia e é mantida pela agressão das bactérias periodontopatogênicas, este trabalho objetivou identificar a presença de Pgingvalis (Pg) no biofilme subgengival em indivíduos com periodontite crónica severa, bem como avaliar o leucograma respectivo.Material e métodos: Oitenta e quatro voluntários não-fumantes foram selecionados para o estudo: 43 pacientes com periodontite crónica severa (grupo caso - PCS) e 41 indivíduos sem periodontite (grupo controle - NP). Parâmetros clínicos periodontais e o leucograma foram avaliados. Amostras do biofilme subgengival foram coletadas para detecção de Pg pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR). Para a análise estatística foram usados os testes t-student e Mann-Whitney (p<0.05). Resultados: Foi detectada a presença de Pg no biofilme subgengival de 29 pacientes (67,4%) do grupo PCS, não sendo observado este periodontopatógeno em nenhum dos indivíduos do grupo NP O grupo PCS apresentou significantemente valores mais elevados do que o NP no número de leucócitos totais e no número absoluto de neutrófilos. Conclusões: Os resultados mostraram que na maioria dos pacientes do grupo PCS foi detectada a presença de Porphyromonas gingivalis e que esta infecção bacteriana pode refletir-se na leucometria.

SDS-PAGE and Western blot analysis of somatic and extracellular antigens of Corynebacterium pseudotuberculosis

Diferentes técnicas para isolar e descrever antígenos das frações secretadas de superfície e somáticas deCorynebacterium pseudotuberculosis foram estudadas por SDS-PAGE e imunoblot, utilizando-se pool de soros de cabras naturalmente infectadas. Os antígenos secretados foram obtidos do sobrenadante de cultura da bactéria cultivada em meio quimicamente definido ou em meio BHI (Brain Heart Infusion). A fração de superfície foi obtida por tratamento com NaCl 1M, e as frações somßticas foram obtidas por vários procedimentos (detergentes e ultra-som). Pela coloração por Coomassie blue, foram detectadas 20 bandas na fração secretada, 35 bandas no extrato de superfície e entre 40 e 50 bandas, a depender do processo de extração, na fração somßtica. Entre todas as frações estudadas, foram detectadas 16 proteínas imunorreativas. As bandas com pesos moleculares de 125, 108, 75, 68, 41, 40, 31 e 24 kDa foram reconhecidas commaior intensidade e todas elas foram encontradas na fração secretada. A utilização do meio quimicamente definido permitiu revelar, na fração secretada de C. pseudotuberculosis, a presença de proteínas de alto pesomolecular que não tinham sido previamente descritas.

Produção de sonda de DNA diretamente biotinilada com N-hidroxisuccinimida biotina ester (BNHS) / Labeling DNA probes directly coupled with biotinyl-N -hydroxysuccinimide ester (BNHS)

A utilização de sondas de DNA para análise genômica em fase sólida tem se expandido e ultrapassado as áreas da pesquisa, estendendo-se ao terreno do diagnóstico de rotina nas áreas de medicina humana e animal, bem como nas ciências forenses. Estas sondas têm sido utilizadas desde o surgimento da primeira técnica de hibridização descrita com o southern blotting, que envolve a imobilização, em filtros de papel, de fragmentos de DNA separados eletroforeticamente. Outra técnica descrita como o dot-hibridização é menos complexa do que o southern convencional por não requerer o passo prévio de eletroforese e por ser menos exigente quanto à qualidade do DNA, já que dispensa a digestão com enzima de restrição. A marcação mais comum para estas sondas é o fósforo radioisótopo (32P), que, apesar de sua alta sensibilidade, apresenta os inconvenientes de risco físico, necessidade de autorização para manipulação de radioisótopos, alto custo e uma vida média muito curta. Uma série de alternativas para o 32P têm sido utilizadas, com marcas diretas ou secundárias, entre elas a biotina, que tem mostrado grandes vantagens e tem sido usada também em laboratórios especializados e bem equipados. Este trabalho descreve uma modificação do método clássico descrito para sondas de DNA acopladas por biotina hidrazida. Utilizamos a N-hidroxisuccinimida biotina (BNHS) em dimetilformamida, para marcar resíduos de citosina disponíveis em segmentos de fita simples de DNA extraído de Corynebacterium pseudotuberculosis. A variação da proporção de biotina e de DNA, bem como sua especificidade e sensibilidade, foram cuidadosamente testadas e criteriosamente analisadas através de ensaios de hibridização, adsorvendo-se DNA cromossômico do C. pseudotuberculosis e outros DNAs em papel de nitrocelulose, seguindo-se a incubação com as sondas biotiniladas descritas,avidina-peroxidase e revelação com 4-cloro-1-naftol. Os resultados mostraram que a sonda de DNA produzida tem as características favoráveis...

Avaliação da resposta imune humoral em caprinos inoculados com uma vacina viva atenuada liofilizada contra Corynebacterium pseudotuberculosis / Evaluation of the goats humoral immune response induced by the Corynebacterium psudotuberculosis lyophilized live vaccine

A linfadenite caseosa (LC), comumente chamada de mal-do-caroço, é uma doença que acomete ovinos e caprinos e tem como agente etiológico Corynebacterium pseudotuberculosis. É um patógeno intracelular facultativo de macrófagos e é filogeneticamente relacionado com Mycobacterium tuberculosis. É uma doença de ocorrência mundial, caracterizada por formação de lesões necróticas encapsuladas caseosas, localizada principalmente nos linfonodos externos e pulmões. A transmissão se dá provavelmente através da pele, pelo contato de animais sadios com animais portadores de abscessos que evoluem a supuração. Eventualmente, tem sido encontrada em bovinos, porém é em ovinos e em caprinos que assume importância econômica e sanitária. Machos e fêmeas podem apresentar a doença em qualquer estação, porém encontram-se mais doentes com o desenvolver da idade, principalmente após um a dois anos de vida. A enfermidade causa sérios prejuízos a essas espécies, constituindo uma limitação zoopatológica às suas explorações. Com cerca de 80 por cento do rebanho nacional, a região Nordeste é a maior detentora de caprinos do Brasil, onde esses animais são essenciais ao sustento do pequeno agricultor. Corynebacterium pseudotuberculosis causa consideráveis prejuízos econômicos à região, que vão desde a condenação de pele e carcaças em razão de abscessos, até perdas em eficiência na reprodução ou na produção de carne e leite. O presente trabalho teve como objetivo avaliar em caprinos a resposta imune humoral induzida pela vacina viva liofilizada, elaborada com a cepa 1002, da Empresa Baiana de Desenvolvimento Agrícola (EBDA). Os resultados evidenciaram que o referido preparado liofilizado promove a produção de anticorpos específicos em doses iguais ou maiores do que 109 CFU e que o tratamento ministrado não provocou lesões nos animais vacinados.